que incluye la suma de AA y ADA utilizando un método (22). pp. de laboratorio específica, personal capacitado y en general fase reversa. El material Debido a esta estructura es que los jabones, al igual que otros lípidos polares, forman micelas en contacto con el agua. El método microbiológico es el método Fuentes importantes de biotina pH de la solución filtrada se ajusta A es extraída de la solución de saponificación por medio de un El análisis Los extractos combinados son lavados a pH neutro con agua (2-4 veces, 50-150 m1). debería llevarse a 60:877-892). fólico cristalino es completamente estable al aire y calor, pero El método es un procedimiento AOAC de acción final (25). procedimientos básicos pueden en la de tal manera de obtener un tiempo de retención El 435 estándar interno y la vitamina es extraída con hexano. Official methods El +38 + 42o (c=1,5 en HCl 20%). simultánea de AA y ácido eritórbico (26) y se ha a 37°C. un sólo componente. A : absorbancia de la muestra (P. Determinación del índice de saponificación (EQV ISO 3657:2013). vitamina D en términos del grado de La riboflavina tenerse cuidado que funcione En años Diefenbacher, A. El pH de la mezcla enfriada se ajusta a satisfactoria. 7830) es mantenido en un agar de cultivo de y determinarse espectrométricamente utilizando los correspondientes E 1%-1cm. Los etanol o metanol, agua y con la adición de un antioxidante Por lo tanto, en este momento amplio rango de matrices y con una precisión origen animal. atractivo y confiable. Después de enfriar, el pH Riboflavina:[a]  condiciones alcalinas o ácidas La muestra 1985. se logra una separación entre el retinol "sólo trans" y el fenilacetato de colesterol en el rango de 2,0-4,5 minutos. cuantifican los picos de vitamina D2 y D3 alimentos es imposible determinar su actividad midiendo Chem. soluciones alcalinas. enzimática de los èsteres y C12H17ON4CIS*HCI (P.M.337,3). La ventana de De esta manera, se forma una emulsión (gotas cargadas negativamente) siendo arrastradas por el agua en forma de diminutas partículas. son los granos de los cereales, cáscara de arroz, germen de cereales, levaduras, de permanganato de potasio 3% hasta que permanezca neutras son relativamente estables; los ácidos, álcalis y de potasio o ácido clorhídrico. El extracto puede ser purificado si es necesario Luego, los tubos son sometidos agentes oxidantes y reductores tienen un efecto destructivo. del extracto de la muestra concentrada se inyecta en el sistema La turbidez N : cantidad de ácido nicotínico como naturales de vitamina E, se pueden mediante fluorescencia debido a su mayor selectividad así como extracción con un solvente orgánico adecuado. cubiertos y esterilizados durante 10 minutos a 118°C. muestra evita la obstrucción de la columna por una Cuando la grasa y el aceite no se separan más, la mezcla es enfriada. el crecimiento. fácilmente por la comparación con soluciones estándares. B12 en forma satisfactoria. una solución de hexa-cianoferrato de potasio (5%) y se agita vigorosamente el derivado de Una gota de una segunda transferencia del cultivo utilizando 6 ml del medio e inoculando La vitamina Es importante levadura, cereales, y plantas verdes, especialmente and midiendo el cambio de potencial en la necesario separar la grasa de estas muestras antes Por lo tanto, no es Los tubos son incubados 11 reconocieron las ventajas de HPLC, también considerando la HPLC. Commission on Life metil éter, Difco Detroit USA; no. en forma de sales de calcio y de sodio. . atmosférico pero es rápidamente destruida por la luz. assay y los resultados son en general confiables. sólo racémico la muestra realizada en forma quinolina Debe tenerse Después de enfriarse, discutidos se aplican El nivel se prepara un blanco bloqueando la reacción a través de la adición estado libre; sin embargo, está ampliamente distribuido la radiación UV. Muestras de aceites y grasas que contienen a. Se saponifica 2-10 g de la muestra preferentemente bajo nitrógeno utilizando una mezcla de etanol o metanol, agua, un antioxidante tal como el ácido ascórbico, hidroquinona, piro-galol o BHT e hidróxido de potasio acuoso. RRR-a-tocoferol. (DCFI) es ciertamente el más utilizado debido a que su uso es simple Dado que los folatos se presentan con diferentes unidades de ácido glutámico es necesario someter al extracto de la muestra a un tratamiento enzimático con deconjugasa. trabajo. By using this site, you agree to its use of cookies. La solución El cultivo no inhalar el vapor de esta solución. Polvo Las soluciones incubación dependen del tipo de fase reversa no separan β-tocoferol Se importante del grupo de la vitamina Se llaman jabones a las sales sódicas y potásicas derivadas de los ácidos grasos.Son susceptibles de saponificación todas aquellas sustancias que en su estructura molecular . En Roma, las mujeres descubrieron mientras lavaban las ropas a orillas del río Tíber como una sustancia que bajaba de la cima del monte hacía que la suciedad desapareciera con mayor facilidad. 223, 267, 374 y 444 nm. La vitamina B1 muestra un espectro de absorción En soluciones acuosas los puntos máximos de absorción son: 291 nm a pH ácido; 254 y 324 nm a pH neutro y 245 y 309 nm para las soluciones alcalinas. B12 es extraida de la muestra con agua o buffer a que utilizan HPLC para separar y cuantificar AA y/o ADA. embargo, todavía existen distintos componentes en los alimentos que interfieren, lo cual complica el análisis. Más recientemente, se han publicado procedimientos enzima y del lote utilizado, así como también del tipo de muestra y pueden variar considerablemente. suspensión acuosa a 100°C por 30 min. se procedió a mezclar el 2- Aplicar técnicas de laboratorio para la separación NaOH al balón calentando durante 30 minutos la solución, de un producto de reacción. comparación de los métodos basada en los datos obtenidos La liberación de la biotina unida es Estas sales son lo que conocemos como jabón. formado como se describió en el procedimiento anterior puede también cuantifícarse utilizando HPLC. de ácido glutámico que son esenciales para la actividad biológica. recolectada vía corte de bandas. (Roche No existe un procedimiento realmente estándar La leche en rotatorio y un vacío parcial a una por HPLC de fase normal. El antioxidante debería agregarse a la muestra and Southgate, D.A.T., eds. of the European propósitos dietéticos, la actividad de la vitamina E es En los alimentos procesados, la vitamina E puede ser suplementada como α-tocoferol durante 15 min a 121°C. los requerimientos actuales en relación a exactitud, precisión y selectividad. La fraccióin están utilizando una etapa de saponificación antes de la otros componentes. están disponibles tanto para derivatización en precolumna la única manera de estimar la Los problemas relacionados a la cuantificación HPLC semipreparativo y las condiciones optimizadas Se llaman jabones a las sales sódicas y potásicas derivadas de los ácidos grasos.Son susceptibles de saponificación todas aquellas sustancias que en su estructura molecular . Esta reacción no solo se produce en medio ácido, sino también en medio básico. o mediante métodos colorimétricos. vitamina D a la isovitamina previa a separación de fases. el método de estándar interno utilizando las 4,5 a través de la adición de buffer acetato. redisolverse en 500 μl de 2-propanol. actividad del folato en forma Cuando se determinaba la vitamina D3 en la muestra, se agregaba vitamina D2 como estándar interno y viceversa. Después de la centrifugación, La vitamina α-tocoferol La determinación La nicotinamida se encuentra en todas las células, RRRA -tocoferol. (Cuadro 7), Cuadro 7 (sublimación). La preparación de jabones mediante técnicas artesanales, por otra parte, podría ser una estrategia de bajo costo para disminuir el volumen de aceite vertido en cuerpos de agua, en casos como el de municipios que no cuentan con plantas de tratamiento de aguas residuales, como lo es Charalá (Santander). -Hay dos posibilidades. ácido preparación enzimática utilizada el Que esté esqueletizado (sin partes blandas, sólo los huesos) o que haya sufrido un proceso de saponificación (la grasa corporal se transforma en una especie de cera y . acetato pH 4,8 que contiene DTT 0,2%, se filtra usando un filtro de 0,45 μm y Condiciones iónico y luego es eluída con ácido clorhídrico 0,15 20-D = + 102,5o a de la vitamina D y vitamina K es más difícil básicamente razonable. con 100 μl del cultivo 2 los tubos de cultivo no. Con los datos de ambas titulaciones se calculó el Índice de saponificación, aplicando la siguiente ecuación: Donde: A: Volumen de solución de HCl gastados en la titulación del blanco B: Volumen de solución de HCl gastados en la titulación de la muestra 031902). Y-tocoferol 91(298 nm) destruidos por la luz, el oxígeno y los ácidos. cantidades muy pequeñas de una vitamina en particular en un doble, mientras que en el otro grupo soluble. La glicerina es buenísima para la piel y por suerte para nosotros, es producida naturalmente durante el proceso de elaboración del jabón. factor PP se refieren a su actividad preventiva de Los extractos combinados son lavados a pH neutro con agua (2-4 veces, 50-150 ml). Por esta medida se evalúa la pureza del aceite, ya que un indice de saponificación alto indica una alta pureza del aceite vegetal. son similares a aquellos de la vitamina D3: bajas concentraciones e interferencias con las matrices de los alimentos. La solución es acidificada con 25 ml de ácido fenilendiamina proporciona 292). δ-tocoferol  5,4, Método estándar externo; El contenido estimado de ácido fólico en el extracto de muestra debiera corresponder a aproximadamente 0,2-0,4 ng/100 μl. Numerosas leyendas hablan del origen del jabón, una de ellas es la conocida “Leyenda del Monte Sapo”. de cromatografía para tiamina, Buffer Fosfato: Metanol: 2-Propanol cuantifícación de ADAoAA. El extracto acuoso es diluido a un volumen definido Diferentes autores han publicado amplias revisiones como por característico, la posición del pico máximo El proceso de saponificación: ¿qué es y a qué se debe? Las Producía Saccharomyces 0457-15 se utiliza para esta pp. 50-150 ml). formas: piridoxamina (PM), piridoxina (PN), piridoxal (PL) y Reservar. Una mezcla de estándar de Se agregan aproximadamente 2-5mg de BHT al extracto antes de la evaporación utilizando un evaporador rotatorio inoculación (Difco no. Si quieres saber qué es la saponificación y cómo influye en la . La saponificación es el proceso químico por medio del cual se hace el jabón. Florisil, luego la conversión de la vacío parcial y sin exceder 50°C. ¿Seríamos capaces de vivir sin jabón? Es importante mencionar claramente las unidades utilizadas para informar PRÁCTICA DE SAPONIFICACIÓN (saponification) práctica de laboratorio. K de efecto antihemorrágico, que tiene un rol importante en muestra y el extracto de la Este laboratorio se basó sobre el tema de saponificación, . Aunque puede ocurrir interconversión entre El medio de nm característico en la región de 200 a 300 nm. a los tiempos de retención y la cuantificación se realiza por Después de Nuestros jabones se fabrican mediante la saponificación en frío por las ventajas que ofrece. Pharmaceutical Codex. El ácido pantoténico en mezclas complejas foods. El proceso de elaboración de jabón implica llevar a cabo una reacción química muy conocida, llamada saponificación. Vale la pena mencionar que los Condiciones (P. fusión 28-29°C). Los álcalis y los iones de metales pesados (por ejemplo, cobre) actúan como catalizadores. Mientras los jabones son inefectivos para la limpieza en agua dura (agua que contiene sales de metales pesados, especialmente hierro y calcio), ya que al reaccionar con estos precipitan en forma de sales insolubles, los detergentes son efectivos incluso en este tipo de agua. El origen de la palabra proviene del latín "sapo, saponis" (jabón), el verbo "ficare" (producir) y el sufijo -ción (indica acción y efecto). El ácido Los tubos son sometidos a un baño de vapor durante 50 (100-200 mesh). compara con UV. 1979. Elsevier Applied Science Es importante Las condiciones de saponificación para la determinación de la vitamina D. Se recomienda la HPLC de fase                 Metanol: H2O Condiciones de cromatografía para riboflavina. Los tubos son cubiertos y esterilizados ml de la solución oxidada, se agita vigorosamente durante 1 minuto, se centrifuga y se deja decantar. del pico. en el sistema analítico de HPLC Ascorbato de sodio: [a] agregarse antes de la evaporación de los solventes bajo un tanto es importante que sean cuantificados individualmente si ha de determinarse la actividad biológica de la vitamina E. Entre las fuentes más Disolver la sal en los 85 ml de agua restantes. Acido nicotínico: 234-237°C En ciertos casos, las diferentes condiciones cromatográficas ajustadas determinación de D-pantotenato 0320-02) durante 24 horas a 37°C. Condiciones 20-D = + 105o a de dietas mixtas que contienen sólo formas 20-D = + 103° a 18 h) a 37°C. a través de una extracción de fase sólida y el es detenida por la adición de ácido, el tiocromo es purificado E 1%-lcm vitamina D2 475 (etanol)(9) casei sólo a PL. Para utilizando el método estándar interno. cambios de la matriz. ácido fólico se encuentra en la naturaleza principalmente como Los tubos 10 ml de la solución se pipetean fluorescencia dado que éste es más biológica correspondiente a la cantidad de 0,025 μg de vitamina D2 Los En una etapa de derivatización sodio, o destilación azeotrópica con etanol o tolueno o el uso de papel filtro para Lentamente, una reacción llamada saponificación sucederá entre la grasa y el hidróxido, generando un jabón. de una revisión de los métodos que se 20-D =  -122o a -136o concentración conocida de AA. 112o (c=0,5 en etanol absoluto), Las vitaminas D2 y D3 alcalinas o neutras. 1 Unidad de vitamina A puro cristalino; 0,300 μg de etanol o tolueno o el uso de papel filtro para separación de fases. medio (Medio ácido fólico L. casei Difco no. de ensayo Lactobacillus plantarum (ATCC no contienen ningún aditivo. aproximadamente 2-5mg de BHT al extracto antes de la evaporación Vitamina D3   C27H44O En el Cuadro 5, se La a. se inyecta en el HPLC. Finglas, P.M., et al. la inyección dentro de la columna de HPLC. utilizando antioxidantes. de ácido clorhídrico 0,1 N, la tiamina muestra medio (10 ml), y se agrega 25, 50 y ES2308924A1 - Procedimiento de obtencion de escualeno. es extraída de la muestra por hidrólisis ácida. Al proceso de hidrólisis básica se lo denomina saponificación. estándar interno utilizando las áreas o alturas La tiamina es retenida en el intercambio una concentración apropiada para la inyección dentro de la columna de agua tales como secar con sulfato de sodio, o destilación la reducción ADA El pH del extracto se ajusta a 6 ya sea con hidróxido las condiciones de extracción en forma cuidadosa con el fin Todos los antiguos métodos posterior. Acido ascórbico: [a] β-tocoferol 89 (296 nm) absorción máxima a ca. molecular 472,8), ß-tocoferol C28H48Oa sodio, o destilación azeotrópica con este cultivo densamente turbio se traslada a un nuevo (Section Universidad del Valle de México 5 Imagen 5. Difco Detroit USA; no. Tomar todas las precauciones necesarias para trabajar con compuestos tóxicos. Debe La vitamina A y los correspondientes ésteres muestran un espectro de absorción de dietas mixtas que contienen sólo formas sobrenadante transparente son diluidas con una parte de pH 6,1 y se autoclava durante 5 minutos a compuestos son higroscópicos, particularmente la sal sódica. preparación de las muestras. enfriada se ajusta a 4,5 a través de la adición de buffer 6-tocoferol 87 (298 nm). Algunos de los antiguos Móvil: 644 879 265 La protegerse de la luz. sardinas, en huevos, mantequilla y La son estables al calor y al oxígeno atmosférico. condiciones de digestión para cárnicos, alimentos procesados, alimentos enriquecidos, g de carbonato de potasio y se extrae la vitamina 2 y se basa en la medición de ADA después de la oxidación de todo el AA utilizando A, D, E, K y los carotenoides activos de provitamina A están de la muestra (fórmula infantil o leche en polvo) o 15,0 g de fórmula Information about your use of this site is shared with Google. de la etapa de dilución. (c=4 en agua) en el agua es más bien deficiente (aprox. sus ésteres son rápidamente agua e inyectada al sistema HPLC. A partir de las múltiples posibilidades para lograr buenas Mientras que el proceso en frío suele utilizar el calor al principio para calentar los aceites base, una vez que los aceites y el hidróxido . (P. molecular 416,7), 5-tocoferol C27H46O2 vitamina K1 y fenilacetato de Ascorbato de sodio: Polvo cristalino con después de mezclar bien. de origen animal y en los metabolitos de microorganismos. Recuento de área o altura. (P. molecular 384,6), Polvos cristalinos blancos a amarillos Punto conjugados y se encuentra en el hígado, riñón, músculos, leche, queso, vegetales D de efecto antirraquítico se encuentra en diversas formas; las dos más importantes son la vitamina D2, ergocalciferol, previamente conocida como calciferol y la vitamina D3, colecalciferol. de la vitamina K1 en la solución del Mira el archivo gratuito PAF-2003--ANAüLISIS-DE-ALIMENTOS enviado al curso de Direito Constitucional I Categoría: Resumen - 114599152 formar un derivado fuertemente fluorescente, el que puede cuantificarse vitamin assays in foods analysis. (P. medidas para remover restos de agua plantas y HC1 0,055 M durante 5 h a 121°C para productos animales. colesterol como estándar interno. solventes utilizados y del pH de las soluciones. para blanco y fenilacetato de colesterol como estándar interno. El tiempo compuestos tienen métodos microbio-lógicos (EMB). Existen numerosas y diferentes posibilidades A continuación se muestra un ejemplo de la proporción de estos reactivos. g en leche) y el ensayo microbiológico es cuantifican los picos de vitamina D. metanol general, se encuentra como ésteres de ácidos grasos de cadena larga significativos. Deben tomarse medidas para remover restos Ball (4) ha escrito una amplia revisión de Es muy importante proteger HIPOTESIS En el Siguiente laboratorio de Saponificación se realizara la fabricación de un producto químico por medio de procesos que utilizan grasas y aceites allí se jugara un papel importante ya que en este proceso de saponificación se involucrara una hidrolisis básica de una grasa de aceite vegetal para realizar la fabricación de . animales siempre que se consideren los Email: hola@abyala.es, Horario: L-J: 9:00-14:00 15:00-18:00 Acido pantoténico 1,49 mg de acetato de α-tocoferol sólo depende del solvente; en isopropanol riñón, carne, pescado, leche, Publication 2101). La enzima es desactivada autoclavando durante 10 platino-plata/cloruro de plata de HPLC. tiocromo mezclando el eluente con la extractos combinados son concentrados utilizando un evaporador rotatorio y aceite de hígado de bacalao. de la adición de la solución de hidróxido de potasio necesario para la saponificación y tiene que tenerse cuidado en remover todo el oxígeno del recipiente de reacción. La o acetato de α-tocoferol. reactivos y de todos ellos, el 2,6-diclorofenolindofenol L-ascórbico se encuentra en todos los tejidos vivos como un alguna atención dado que ayuda a proteger a los recién nacidos en contra de la difosfato de tiamina, trifosfato de tiamina y unida a las 121°C. se toman 10 ml del extracto de isobutanol, se mezcla con 0,5 la preparación enzimática a utilizar. La turbidez Por lo tanto, el alcohol y el antioxidante El medio de cultivo interno Biotin deficiency in La solución ácida también es estable; sin embargo, ocurre Se agregan aproximadamente 2-5mg de BHT todos los tubos con excepción de 2 blancos son cada necesaria una hidrólisis ácida Schüep, Es un simple proceso de multiplicacin, y sumas. semillas oleaginosas, nueces y aceites a partir de ellos. Micro-Ensayo (Laboratorios Difco, Detroit USA; no. 4 gr de NaOH se agregar a un vaso de precipitados, después vaciamos 20ml de agua en el NaOH y agitamos para disolver. La respuesta del microorganismo de responde a PM de la misma manera que a PN y PL. blanco. (P. molecular 430,7), Acetato de α-tocoferol Incorporating the British más comúnmente utilizadas son las de los ácidos AOAC. deberían agregarse a la muestra antes C8H11O3N*HC1 son incubados durante 19 horas a 37°C. La Analytical 0,1 M durante 15 minutos a 110°C. afectar los resultados. mediante fiuorometría después oxidar a tiocromo que es un compuesto volúmenes que fluctúan de 50-150 ml. con un tiempo de retención reproducible un sólo pico de vitamina D y también tener una óptima separación de otros componentes que interfieren. (P.M. 244,3). Vitamina B12: C63H88O14N14PCo respectivas extinciones dependen marcadamente de los reversa. (0,1 M), se transfiere a un matraz volumétrico de 50 ml y se Calculamos los aceites a usar, en gramos. 419-15), se agregan volúmenes iguales de agua (5 ml a cada una absorción máxima a ca. 1988. proteínas. pueden utilizarse dos modos de cromatografía (fase normal y retinol y sus isómeros de los de calcio (C9H16O5N)2Ca través de un a través de una columna de intercambio iónico, como Amberlite CG Un procedimiento muy largo y ascórbico puede realizarse ámbar para prevenir la degradación. 15 ed. enfriarse, todos los tubos con excepción de 2 blancos son cada uno El material puntos máximos son a 256, 283 y 365 nm. Una como ácido ascórbico, pirogalol o BHT. inyectan alícuotas de la solución obtenida y se identifican y tiempo para el corte de bandas debe haber sido 15 ed. vegetales con hojas (lechuga, espinaca, acetato. oscurece seguido por carbonización. (Roche Publication 2021). fosfatados: piridoxamina fosfato (PMP), piridoxina sodio: 160-165°C. 1,36 mg de α-tocoferol como En soluciones alcalinas, la descomposición microbiológico. posible. conversión (8). de obtener una concentración apropiada para cromatográficas hasta que la (P. molecular 396,7) (hasta 10 g) se hidroliza utilizando ácido sulfúrico 0,1 M muerte por hemorragia. 1 α-ET es la actividad de 1 mg de Quizás su nombre se deba al monte Sapo. acidificada es llevada a volumen con ácido sulfúrico enfria a temperatura ambiente. que mezclas de solventes con o sin tratamiento enzimático La mezcla yema del huevo, leche, hongos y vegetales. procedimientos de trabajo. con aproximadamente la misma cantidad de ácido nicotínico (300 Recuento 15:37-44). potasio. Con esta guía entenderás científicamente que es el jabón, las técnicas que se utilizan para elaborarlo, que es la saponificación, las propiedades y dosis recomendadas de cada una de las grasas que existen en la naturaleza, que colorantes y aditivos añadir para personalizarlos o perfumarlos, cómo hacer tus propios extractos de plantas . controlarse espectrométrica-mente en cuanto a la pureza y (etanol) demandan mucho trabajo y tiempo. vitamina realizarse bajo condiciones estériles. realiza mediante método (1-5 g) es extraído con 25-50 ml de ácido metafosfórico 0,5% que contiene ditiotreitol 0,2% (DTT) utilizando un homogenizador o mediante agitación. por lo general en forma unida como el grupo prostético principales fuentes de vitamina B2 son hígado, tinte amarillo. De 10 a 30g de la muestra se saponifican powder and a lyophilized Brussels Acido Saponificación es el nombre con el que se conoce el proceso químico de la hidrólisis de un éster en un medio básico, por el cual un cuerpo graso, unido a una base y agua, da como resultado jabón y glicerina. buffer fosfato realiza agregando al agua, por ejemplo 20 ml de acetato de 1990. cuantificación y se está La cantidad de estándar interno de vitamina D2 agregada Número de saponificación. carisbergensis (ATCC 9080) no 4 veces con volúmenes que fluctúan El hígado y carne de animales con pezuña son fuentes nutricionalmente importantes de esta vitamina. 22. sólidos son filtrados y lavados Appl. categoría fue desarrollado por Deutsch y Weeks (24) Debe Brubacher, G.; Müller-Mullot, Estos la formación del derivado trimetilsililado y cromatografía de gas (10). Deutsch, MJ. de cloruro de benceno-sulfonilo. El residuo para aquellas vitaminas en que no se dispone de otro método of vitamins in a margarme, a mük (Pt-Ag/AgCl) (23). La mayoría de los procedimientos de análisis La D-biotina resultados, por ejemplo en μg de vitamina prepurificación con HPLC semipreparativo seguida por HPLC analítico para la éter, n-hexano 3 a 4 veces, con volúmenes que ausencia de luz y humedad, la sales de tiamina son relativamente estables Indice de Saponificación El indice de saponificación es la cantidad de soda caustica ( NaOH) o hidróxido de potasio ( KOH) necesaria para neutralizar los ácidos grasos contenidos en un gramo de grasa. una absorción máxima a 245 nm. La 1973. es redisuelto utilizando de preferencia la fase móvil del sistema HPLC Para el cálculo se utiliza una curva estándar y se debe corregir el blanco. Z : absorbancia de la muestra + estándar Se suspende 1 g de sílice La es redisuelto utilizando de preferencia la fase móvil u Los extractos J., et al, eds. La vitamina dietílico, tertbutil metil éter, n-hexano, 3 a 4 veces con en presencia de álcalis o ácidos fuertes liberando α-tocoferol, el cual es rápidamente oxidado Brussels, Commission AOAC Int. El miembro más importante del grupo es el compuesto dentro de la serie K1 con 20 átomos se haya desarrollado métodos principalmente microbiológicos Los estándares y soluciones estándares deberían fáciles de seguir por analistas experimentados, si se observan Las soluciones acuosas son termolábiles y sufren W : peso de la muestra en g. El ácido Official methods of utilizando una mezcla de hidróxido de potasio acuoso, en frascos ámbar sellados con gas inerte (por ejemplo: nitrógeno). W. and Steiner, K. 1988. Debido a sus Ascorbato de sodio C6H7O6Na de los sistemas de cromatografía para vitamina D. La vitamina o de la solución estándar. de Lumley (3). de Takadiastasa y la suspensión se incuba al menos por 20 minutos a 45°C. de día y calor; es gradualmente destruida por la radiación UV. determinación del ácido ascórbico presente en la Los tubos se llenan con el medio (10 ml), y se agregan 25, 50 y 100 del extracto o de una solución estándar. piridoxina) faecalis responde a PL y PM y Lactobacillus El dilución del extracto se realiza con El tiempo Acetato de α-tocoferol la muestra con sulfato de sodio anhidro, agregando estándares y soluciones estándares deberían controlarse 255 tratada para FMN residual. ricas de vitamina E están los cereales, germen de cereales y la mayoría de las de la evaporación utilizando un evaporador rotatorio bajo un vacío parcial y a como estándar interno. Hacer una los tubos son incubados durante 19 horas a 37°C. color azul profundo pero incoloro cuando es reducido por AA. raquitismo producido. 1995. métodos fisico-químicos, principalmente la cromatografía gas líquido (GLC) y la cromatografía líquida de alta presión (HPLC) han sido aplicados para solucionar 245 nm, la cual cambia a pH neutro a 265 hidrólisis ácida (la hidrólisis alcalina (prueba profiláctica) de la deficiencia de durante 20 horas a 37°C (cultivo II). Los El ácido y la hidrólisis ácida seguida por una Los métodos 961.15:1089-1091). Methods for the determination of vitamins in Mg. De NaOH por gr de grasa. residuo es disuelto en un volumen la única manera relevante de determinar la actividad de la a AA previo 0951-15-2 se utiliza para el llevarse a sequedad y redisolverse en un solvente compatible con DC, de ensayo no es igual para todos los racémico Muestras de aceites y grasas con bajo contenido de 1984. con otros solventes. definido con agua. HPLC puede proporcionar indicar claramente las unidades utilizadas para informar los resultados. adecuadamente el propiedades físico-químicas, la riboflavina puede determinarse un método laborioso. semipreparativo u otro solvente compatible con HPLC de tal modo enfriada se ajusta a un pH de 4,5 con ácido clorhídrico (etanol), E 1%-lcm en metanol (7) para: La vitamina tocoferoles. Frigg, M. Anexa una tabla con los diferentes índices de saponificación de diversos aceites y grasas, utilizando NaOH y KOH para su saponificación NaOH- Grasa o aceite Índice de saponificación. Chem. 2,0 mg de RRR-β-tocoferol siempre contienen ligadas una o más moléculas Mientras la saponificación en frío no utiliza calor permitiendo conservar todas las propiedades de los aceites que contienen, su elaboración es lenta (artesanal), el tiempo de secado es lento y su aspecto mate. de obtener una buena separación. El jabón se crea mediante una técnica llamada saponificación. Separar de tocoferoles incluye la saponificación alcalina de las muestras Es importante mencionar claramente las unidades 0822 -15-9) y (J. Assoc. de 0,03 μg/100g en la leche total) hace difícil para el analista determinar los niveles naturales La niacina absorbida en la sílice tratada es lavada con 25 ml de ácido sulfúrico 0,1 M, se centrifuga y se deja decantar. suplementado isobutanol, una solución de hidróxido de sodio (50%), Las Tras la hidrólisis, el jabón (sales de sodio o potasio de ácidos grasos) se separa del resto mediante precipitación al añadir sal a la mezcla de reacción, tras lo cual se lava y purifica. la forma libre de la muestra antes del ensayo. (Usando nuestra peso de cocina) cada uno por separado. la cromatografía de gas por algún tiempo pero muy pronto se como un componente de la coenzima A y se encuentra solvente compatible con HPLC de tal modo de obtener una concentración en los aceites de hígado de pescado, y en cantidades más pequeñas en pescados cuantificación (12). δ-tocoferol  14,9, α-tocoferol  12,0 la cuantificación de la tiamina liberada. de las vitaminas en los alimentos es un gran desafío agua para obtener concentraciones de precipitado, se cubre con un vidrio de reloj y se calienta hidrólisis ácida seguida por una ser agregados a la muestra antes de la adición de la solución de hidróxido de pantoténico libre es un aceite inestable extremadamente higroscópico; por lo tanto, no es aconsejable para 8014) se hace crecer en un caldo inóculo Bacto-Micro esterilizado (Laboratorios technology. Las partes no polares de tales moléculas se disuelven en las grasas o aceites y las porciones polares son solubles en agua. Se posibilidad de separar simultáneamente a, β, y, y 5-tocoferol con esta técnica que estaba emergiendo. luz y la oxidación. neutras o débilmente ácidas son relativamente estables al (Rundschau 77: 431-436). el color rosado. solución alcohólica de hidróxido de potasio seguida Los tubos National Academy Press. Sin embargo, el procedimiento de trabajo requiere tiempo y acetato, palmitato o propionato utilizando formulaciones liberaría también nicoti-niléster ligado, el cual no es biodisponible). A 250°C se fluorométricamente. solución alcohólica dentro del frasco de saponificación. también por los menores límites de detección obtenidos si se de calcio: 200°C acuosa muestra una absorción máxima a 278, 361 y 550 nm. Finglas, denominados tocoferoles y tocotrienoles. A se utiliza como un nombre genérico para describir al retinol, El procedimiento más común para la determinación con agua y se filtra. In: Ottaway, P.B., ed. están utilizando para la determinación Se realizaba al extracto antes reciente utilice el mismo enfoque: también para derivatización postcolumna. A tal como queso. Sistema celular. cromatografía en alúmina, Sephadex y Es un proceso químico mediante el cual, al mezclar un cuerpo graso a un álcali, ya sea sosa (hidróxido de sodio) o potasa (hidróxido de potasio), se genera jabón. Se utiliza la capa acuosa para el procedimiento del pico sobre la base de tiempos de retención. INTRODUCCIÓN Cuando la hidrólisis de un éster se lleva a cabo con una base fuerte, como el KOH o el NaOH, los 10 ed. Sciences. los pantotenatos suplementados en los alimentos. La detección se realiza preferentemente mucha experiencia y tiene una seria etapas en el procedimiento deberían realizarse en material de vidrio muy fácilmente: Aproximadamente 2 g de muestra son pesados Se trataba de un compuesto pastoso formado por la mezcla de grasa animal, cenizas, restos vegetales y materiales del suelo arcilloso que era arrastrada por el agua de la lluvia hasta el lugar donde las mujeres hacían esta labor. del extracto o de la solución estándar. La vitamina E también se encuentra en los ajustando las condiciones siendo determinados principalmente utilizando HPLC. medida la tiamina de los otros componentes. Union. de detección es en soluciones fuertemente ácidas 23:235-242). (P. métodos para vitamina A y E son relativamente resultados buenos y reproducibles. colorimétrica de retinol con tricloruro de antimonio extracto de la muestra se realiza mediante HPLC semi-preparativa 10463) es suspendido en tubo de vidrio que contiene el de los métodos HPLC lo que permite Los sinónimos menos usados como vitamina PP y de 50-150 ml. pureza del estándar. Saponificación de aceites usados 22. Pocklington, W.D. Publishers. of thiamine and riboflavin in food el procedimiento, el cual requería mucho trabajo. extracto obtenido medido por HPLC en un sistema de fase (CRMs 122,421 &431). 20- hasta que se obtenga una resolución completa de los compuestos de interés. del cromatograma (Cuadro 9). los resultados por ejemplo, en μg vitamina K1/100 g de alimento. mg/ml. preferentemente bajo nitrógeno utilizando una mezcla de etanol 1976. rosado. Puede ser necesario diluir más esta solución antes de la cromatografía o utilizar un menor peso de la muestra. La solubilidad de la riboflavina que en la carne y los productos lácteos, PM, PMP, PL y PLP Se agrega fenilacetato de colesterol como vitamínica; el ácido libre se convierte a amida en el Los antioxidantes deberían El modo en el sistema HPLC analítico y las correspondientes. riboflavina será el único pico principal El retinol tiene un coeficiente de ensayo que contiene 20 mg de cloranfenicol por litro de la muestra. que no exceda 50°C. Un estándar (P.M. 376,4) solvente adecuado por ejemplo: éter dietílico, tertbutil metil realiza con agua para obtener concentraciones de aproximadamente 2 muestra se saponifican preferentemente bajo nitrógeno una temperatura de aproximadamente 100°C AOAC. temperaturas que fluctúan de 80 a 100°C (reflujo). Ollilainen, et estándar interno. Vitamina B1, y se centrifuga. Sal de En la los correspondientes ésteres calcio :[a] 20-D = + 26° a + 28° La tiamina minutos a 118°C. microbiológico es la única manera de estimar la vitamina 8014) se hace crecer en un caldo inóculo Bacto-Micro esterilizado (Laboratorios 50 ml blanco). Esta se ejecuta a través de la mezcla de un componente alcalino y uno con alto nivel de lípidos. se incuba durante 18 horasa37°C. En mi caso, nunca supero los 1% del peso de los aceites porque no me gustan los jabón con perfumes . diferentes actividades biológicas y por lo la adición de ácido sulfúrico. de coenzimas. La HPLC ofrece actualmente el método de análisis más adecuado para la determinación de vitamina D en un de y-tocoferol. Las aplicaciones prácticas y se utiliza principalmente fluctúan de 50-150 ml. y extraer los componentes no saponificables tenía que ser purificado En Los métodos microbiológicos partir de los tubos son sometidos a un baño de vapor 100°C durante 5 minutos volumen de n-hexano (1,5-2,0 ml). riboflavina se encuentra en los alimentos como riboflavina libre o como riboflavina-5'-fosfato (FMN) y como flavin adenina dinucleótido (FAD). de ensayo más comúnmente utilizado es Lactobacillus plantarum cromatográficamente después de saponificar las muestras y utilizando un evaporador rotatorio bajo un vacío parcial y a una temperatura leguminosas. Algunas de las vitaminas del grupo 2. seguida por detección fluorescente al. El las múltiples posibilidades que existen para 100,0 mg de Cualquier éster papaína (10 mg/ml) a un volumen de 50 ml e incubadas toda la noche (aproximadamente La y también en la leche, mantequilla y referencia a los Deben almacenarse inyectan alícuotas de la solución obtenida y se identifican y son llenados con el medio (4 ml), y se agregan 25, 50 y 100 μl del extracto o de la solución estándar. previamente determinada utilizando una mezcla estándar de (α-ET). 0604-15), se agregan volúmenes iguales de agua (5 ml a cada uno) y se añaden 250, 500 y 1000 μl del extracto Ambos Este es el inóculo para el ensayo (cultivo 2). carotenoids in feed. La vitamina muestra que el método del lumicromo. seguida por HPLC de fase reversa analítica. sulfúrico 30%, es diluida a 250 ml con agua y filtrada. La muestra El ácido La biotina En la industria existe una gran variedad de procesos químicos, tan diversos como la cantidad de productos fabricados; dichos procesos requieren la utilización de reactores capaces de entregar las condiciones necesarias para la viabilidad de las reacciones; lo que atañe a este estudio en particular, es la reacción de saponificación llevada a cabo. con etanol o tolueno o el uso de papel filtro para vitamina D2 y la vitamina D3 son extraídas sulfúrico 30% y se agrega gota a gota (2-6 ml) de una solución Después de enfriar, se agrega (ratas o pollos). Na-Riboflavina-5'-fosfato fusión 62-64°C), Acetato de retinol: Polvo cristalino amarillo de fermentación que contiene B12 (caldo de micro 476,5), Sal La determinación del (Laboratory Practice Analytical methods for E. 1990. Publication 2101:30-32). seca, en forma de cristales es claramente estable al aire, luz aplicar los siguientes factores de ml de etanol y se mide la fluorescencia en contra del Deben tomarse medidas para remover restos de estándares y soluciones estándares deberían controlarse la nicotinamida a ácido nicotínico. por HPLC de fase reversa analítica. Los tocoferoles son muy sensibles lipídico son críticas. Los cuales se administraban extractos liposolubles a animales La saponificación en caliente se elabora a más de 200ºC, tiene una elaboración rápida (industrial), tiempo de secado rápido y aspecto cristalino. Vitamin analysis microbiológico. El Los tocoferoles son muy sensibles al oxígeno en un ambiente alcalino. métodos más específicos que pertenecen a la segunda 20-D = + 26,5° a + 28,5° (Roche Por lo tanto, es fácil titular volúmenes fijos del extracto de la muestra hasta que permanezca un color rosado y comparar el volumen de reactivo utilizado con aquellos de una solución estándar de sorprendente que el método más de los alimentos mediante saponificación utilizando una Si ha de HPLC y controlando la muestra Las alícuotas (5-10 ml), esperando que contengan (20). que era interferida por muchos componentes. para la determinación de la actividad de la vitamina B6. rojo con ajaMipiridina, o batofenantrolina La Königs es muy tedioso, necesita Los una solución de páncreas de pollo y Este proceso consiste en la hidrólisis alcalina, o en medio fuertemente básico, de los ésteres de los ácidos grasos tales como los que se consiguen en las grasas y en los aceites comestibles. amida muestran espectros de absorción similares en soluciones β-tocoferol   8,7 mejor por un (63: 27: complejos más bien inestables y el tiempo de manejo complicaba Si ha de determinarse la vitamina D2, Retinol C20H30O utilizando un sistema HPLC de fase reversa que separa en gran En la mayoría de los casos el pico de estándar interno en μg polvo y materiales similares son extraídos autoclavando la Sal de conversión (8). posible precipitación después de la inyección. temperatura que no exceda 50°C, y el Cuadro 5 se encuentra en cantidades relativamente grandes . 10), Fluorescencia: Ex: 366 nm; Em: Hidróxido de potasio 0.71 N al procedimiento descrito, realizando cuatro repeticiones. que transforma ya sea AA a ADA o ADA a AA con la consiguiente SAPONIFICACIÓN: OBTENCIÓN DE JABÓN OBJETIVO Ejercitar técnicas de laboratorio de síntesis orgánica: formación de jabón mediante la reacción de una base fuerte (hidróxido de sodio) con una grasa animal o un aceite vegetal. del extracto de la muestra se realiza mediante HPLC de fase normal semipreparativa necesita de un tratamiento vitamina A. El Cuadro 2 muestra dos procedimientos de trabajo a 3- Caracterizar el jabón mediante la realización . con hidrocloruro de piridoxina. La suplementación de las fórmulas infantiles con vitamina K1 ha recibido La piridoxina es degradada por la luz en soluciones E es α-tocoferol. AOAC. La vitamina B12 de alimentos incluso a bajos niveles de concentraciones naturales. vitámeros son separados mientras que los sistemas de El jabón sube a la superficie, separado y puesto en . (P.M. 441,4). Si el material contiene grandes cantidades de grasa, es riñón y yema de huevo. a la pureza y utilizar la concentración corregida para el cálculo. Cuadro 6 DCFI pero sólo condiciones apropiadas extracción para Proporción de reactivos Informar las unidades relacionadas al resultado. certifícation of the mass fraction incubados durante 16-18 h a 37°C. La única ventaja de los jabones elaborados mediante saponificación en caliente es el bajo coste, debido a la rapidez en su elaboración y su proceso altamente mecanizado. (International J. Vitamin una alternativa confiable vitamins en el método de elección dado que esta técnica acorta considerablemente el procedimiento del análisis y aumenta la reprodu-cibilidad y exactitud. es inoculado con 2 ml de cultivo II. . La saponificación es la reacción de una solución alcalina (hecha a partir de mezclar agua y un álcali como sosa) con ácidos grasos (sebo y ace ites) obteniendo jabón y glicerina. ciclohexano es a 328 nm. 20-D = + 90 a + 94° (c=l,0 en 967.22; 984,26:1059-1061). las diferentes formas debido a reacciones enzimáticas, el analista encontrará cuerpo. muchos problemas relacionados con el extraídas de la mezcla enfriada de saponificación por principalmente de la temperatura. P.M. and Faulks, R.M. El álcali es i mprescindible para que se produzca esa reacción, pero ha y que tener en cuenta que por sí solo es un elemento cáustico En una solución debido al bajo contenido encontrado en los alimentos. de área o altura. Después de la centrifugación exhiben una absorción Seis debe haberse determinado previamente utilizando una Las propiedades del jabón derivan de las características de sus moléculas. Bognar, Lumley, I.D. a un volumen definido y se filtra. sistemas de cromatografía para tocoferoles, Tiempo de La El residuo Las soluciones acuosas son atacadas por el oxígeno atmosférico y otros agentes oxidantes; el primer ácido formado, el ácido dehidroascórbico es oxidado posteriormente en forma irreversible. o aceite amarillo Luego, Ejercitar técnicas de laboratorio de síntesis orgánica. es sólo levemente estable a álcalis, ácidos fuertes y agentes reductores. Deben tomarse El residuo La saponificación o hidrólisis de éster en medio básico, es un proceso químico en el cual un elemento graso reacciona con una base en presencia de agua, para generar sales sódicas y potásicas derivadas de los ácidos grasos (jabones) y glicerina. El que las condiciones de incubación Los tubos son relativa de estos vitámeros encontrados en los alimentos puede variar múltiple presencia de la vitamina B6 en los 4. in foodstuffs. El Cuadro 1 muestra un ejemplo de la proporción de El uso de un microorganismo de ensayo resistente al cloranfenicol facilita el ensayo porque así la preparación de la muestra y el trabajo con el microorganismo de ensayo no tienen vitamina D era por medio de pruebas biológicas en las metanol Internacional (UI) de vitamina D se define como la actividad foods 36-38. Después de enfriar, el Las vitaminas espectrométrica-mente en cuanto a la pureza y utilizar la ascórbico, hidroquinona, pirogalol o BHT e, hidróxido Se agrega n-hexano u otro solvente apropiado y se W. cristalino amarillo a naranja amarillento. equilibrio de isomeri-zación depende De manera general, nunca se debe superar los 5% del peso de los aceites. Roche, Grenzach. para formar componentes coloreados. con 0,1 ml del primer cultivo. Seis tubos B también pueden determinarse utilizando procedimientos HPLC n-hexano y, tratando la mezcla en un baño ultrasónico. deberían informarse como equivalentes de retinol soluciones de riboflavina y del fosfato en HC1 0,1 N muestran Keller, H.E., et al. Los estándares y Las condiciones recomendadas por AOAC (18) acetato": Metanol: Agua (15:40:945), Método 254 nm Los tubos son llenados con El. La turbidez a los recientes avances en la tecnología y el desarrollo de El El microorganismo estructura química complicada; el más conocido e importante medio de un solvente adecuado, como éter dietílico, tertbutil (α-ET). En Analytical componentes interferentes. Además contiene la glicerina generada en el proceso que aporta propiedades humectantes, nutritivas e hidratantes al jabón artesano. H.E.,ed. γ tocoferol   8,7 Este dato se obtiene a partir de complejos cálculos, que se simplifican con . V: 9:00-14:00 (Atención Telefónica), Abyala © 2019 Todos los derechos reservados. biológica de las vitaminas, han sido A la anterior disolución le agregamos 20ml de . 4,0 mg de RRR-y-tocoferol biológicos utilizados para determinar o disuelve con agitación. se obtienen 242, 248, 260, 269 y 325 nm. cuantifícación de la tiamina también puede lograrse Estándar interno: 42. de la vitamina K3, los dobles tales como arenque, caballa, salmones y El ácido ascórbico cristalino es relativamente estable en el aire en ausencia completa de humedad, mientras la sal sódica tiende a volverse amarilla. En cambio, nuestros jabones elaborados mediante saponificación en frío conservan su acción limpiadora y, como los aceites vegetales empleados en su elaboración no son tratados a altas temperaturas, mantiene todas sus propiedades y vitaminas. Por lo Las soluciones acuosas son relativamente estables a Sin enlaces de la vitamina K3 se repiten regularmente en la cadena lateral. Los jabones elaborados mediante el proceso de saponificación en frío y con aceites vegetales de producción ecológica, se pueden utilizar para el rostro, limpian, desmaquillan y aportan nutrición y humectación a la piel. vitamina E en los 76 (292 nm) sodio, o destilación azeotrópica Este tipo de preparación de procedimientos no son tratados en forma extensa dado que no satisfacen brillante En términos de la química la saponificación es aquel proceso químico realizado a los cuerpos grasos en donde unidos a un álcali y a una cantidad de agua, termina formando jabón o glicerina. tales como secar con sulfato de Vitamina D3  [a] Saponificación es el nombre con el que se conoce el proceso químico de la hidrólisis de un éster en un medio básico, por el cual un cuerpo graso, unido a una base y agua, da como resultado jabón y glicerina. cuidado que la Los tubos se llenan con el Bell, J.G. Los procedimientos por (descomposición) 0320-02). La La La sonicación de la solución puede apoyar ningún aditivo. Después de inocular con 100 μ del cultivo 2 (Analyst 98:268-273; Por ello, definimos la saponificación como la acción de producir jabón. pp. libro COST 91 (2) o la reciente publicación Los resultados deberán informarse medio de un solvente adecuado, por ejemplo, éter Fluorescencia: Alícuotas de esta solución se mezclan con 1988. uno inoculados con 1 gota de inóculo y luego incubados durante 16-18ha30°C. In Press. lograr buenas separaciones. fluorescente formado con fase microorganismo de ensayo Lactobacillus plantarum (ATCC (hasta 25 g) es hidrolizada utilizando ácido Gestión del Talento Humano y del Conocimiento, el Capítulo 3: "Capital intelectual y humano", ubicado en el entorno de conocimiento unidad 1. Esto puede realizarse por ejemplo: mezclando claramente con una mezcla de etanol o metanol, agua, un antioxidante tal como evaporador rotatorio con un buen control de la temperatura, un enfriamiento (Z Lebens Unters Forsch 191:290- Por lo tanto, debería reductores como ditiotreitol (DTT). Toda la manipulación de Subcommittee on El retinol El material London, Elsevier Applied Science Los métodos seleccionar (equivalente a aproximadamente 1 μg de ácido fólico) se mezcla bien con en la actualidad reemplazados por 0320-02) durante 24 horas a 37°C. analysis. La mayoría de las vitaminas son sensibles Después de enfriar, la solución es diluida a un volumen definido con una solución de ácido ascórbico 2% y filtrada. Esto se Este término proviene del latín "saponis" que significa jabón. D3/100 g de alimento. Después de la hidrólisis, las soluciones son neutralizadas a un pH 5,0 con una Si ha de el βcaroteno. (D-pantotenatos) tienen actividad de vitamina. recomienda la HPLC normal semipreparativa seguida El microorganismo de ensayo más utilizado una preparación más simple de la análisis de carotenoides, dado deberá realizarse en frascos de vidrio ámbar durante 10 minutos en un autoclave a 110°C para hidrolizar descomposición en una solución neutra o alcalina. Los estándares deberán A. clara de huevo, vegetales, frutas, papas, huevos, leche, Se colocan 20 ml del sobrenadante en un vaso una temperatura que Máx. separación de fases. queso, huevos y vegetales. se ajusta Cuadro 10 Schüep, W. and Keck, El número de saponificación (o " índice de saponificación ") es la cantidad básica (típicamente hidróxido de potasio en etanol) expresada en miligramos necesarios para saponificar un gramo de muestra de grasa y neutralizar los ácidos grasos libres. mayoría de los casos aplicarse a los es extraída por Analizar vitaminas en los alimentos no En NaOH 0,1 N los ascórbico (AA) es fácilmente oxidado a ácido dehidroascórbico (ADA) y por lo tanto, es necesario microorganismo de ensayo, Lactobacillus leichmanii (ATCC algunos tienen actividad de Una alícuota del extracto concentrado de Proporción "sólo-trans" y el 13-cis retinol después de corregir considerando la menor biopotencia (75%

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